S-0306-12

Le système utilise des pressions nettement supérieures à la chromatographie classique, généralement 3 fois plus importantes pour un système UHPLC (1200 bars) que pour un système HPLC classique (400 bars). Une augmentation de pression permet une élution beaucoup plus rapide des analytes étudiés et réduit drastiquement les temps d’analyse, ce qui permet d’augmenter la productivité de l’appareil, surtout dans des situations où les laboratoires produisent plusieurs dizaines d’échantillons/jour. Par ailleurs, attendu que le système peut opérer à de hautes pressions, il est possible de réduire la taille de la phase stationnaire et de conserver le même nombre de plateaux pour une longueur de colonne inférieure. Le spectromètre de masse TOF (Time of Flight) est un appareil permettant une meilleure séparation des ions produits par la spectroscopie de masse et en conséquence une précision inégalable par rapport aux masses impliquées lors du fractionnement. Lorsque les échantillons quittent le système UHPLC, ils sont nébulisés avec un ESI (ElectroSpray Ionisation). Ce système permet la nébulisation des échantillons, les ionise et leur permet d’entrer le TOF/MS. La charge des molécules permet de les maintenir et de les contrôler dans l’appareil via un champ magnétique. Ces molécules sont par la suite acheminées vers le MS où un impact électronique fragmente les plus grosses molécules en ions de différentes tailles dépendamment de la structure originale de ces molécules. Par la suite, les ions sont triés grâce à des filtres spécifiques qui éliminent les particules de trop haute vélocité afin de réduire au maximum l’interférence. Une fois l’interférence réduite au maximum, les ions sont attirés vers le haut où leur masse relative permet d’amorcer un tri entre les plus gros et les plus petits fragments. Les ions sont par la suite réfléchis sur un réflecteur qui achemine le tout sur un détecteur, qui convertit l’impact des ions en photons puis en électrons permettant de générer un signal électrique et en conséquence permet de quantifier les données. Le TOF/MS permet d’identifier et de doser des composés avec des concentrations de l’ordre de pictogrammes et permet de caractériser des masses allant jusqu’à 20 000 m/z. Donc, en plus de permette l’identification de plus grosses structures que le LC-MS classique, le TOF permet une précision accrue sur les valeurs de masse des composés qui sont ionisés.